|
|
Studium maternálně-fetálního mikrochimérismu APC s využitím MHCII/EGFP myšího modelu a clearovacích histologických technik
Knížková, Karolina ; Černý, Jan (vedoucí práce) ; Schwarzer, Martin (oponent)
Mikrochimérismus vzniká výměnou buněk mezi geneticky odlišnými jedinci. Koexistence geneticky odlišných populací buněk v rámci jednoho organismu přináší možné dopady na zdraví a fungování imunitního systému jedinců, ale přesné mechanismy působení nejsou ještě často známy. S rozvojem mikroskopických technologií a softwarů pro analýzu dat se rozšiřují možnosti detekce a fenotypizace těchto vzácných buněčných populací. Mým záměrem v této práci je vyhledání maternálního mikrochimérismu v tkáních embrya a střevech kojených mláďat s využitím MHCII/EGFP knock-in myšího modelu, který jsme k tomuto účelu vytvořili. Bylo vybráno několik různých technologií potenciálně vhodných pro detekci maternálních mikrochimérních buněk v tkáních potomka (fluorescenční light sheet mikroskopie - LSFM, virtual slide mikroskopie a průtoková cytometrie). Byla zde využita pokročilá analýza získaných vzorků z light sheet mikroskopie pomocí tvorby neuronové sítě. Metodou průtokové cytometrie přítomnost maternálního mikrochimérismu nebyla prokázána. Pomocí LSFM byla získána obrazová data ze vzorků střev kojených mláďat, která byla zpracována metodou neuronové sítě. U obrazových dat embryí (E13) získaných stejnou metodou nebyla možná analýza dat vlivem vysoké autofluorescence. Pro porovnání byla použita metoda virtual slide...
|
|
|
Locking in on large volume light-sheet microscopy
Vettenburg, T. ; Dalgarno, H.I.C. ; Nylk, J. ; Coll-Lladó, C. ; Ferrier, D.E.K. ; Čižmár, Tomáš ; Gunn-Moore, F.J. ; Dholakia, K. ; Corral, A. ; Rodriguez-Pulido, A. ; Flors, C. ; Ripoll, J.
Fluorescence light-sheet microscopy is increasingly adopted by developmental biologists to study how cells divide and differentiate to form organs and even entire organisms. The lightsheet microscope differs from a conventional microscope in that the specimen is illuminated by a plane of light orthogonal to the detection axis, thus keeping the out-of-focus areas dark while minimizing any potentially detrimental exposure of the sample. The light-sheet microscope has been found to be the ideal instrument for long-term and non-invasive studies of intact, and therefore three-dimensional, fluorescent samples.
|
host ::
RSS.